蛋白质纯化的一般注意事项

蛋白质提纯的一般注意事项 在展开任何一种蛋白质提纯得时候，都要时刻留意确保它的平稳，维护它的活性，有一些标准化的注意事项必须牢记，它们还包括： 1、操作者尽量置放冰上或者在冷库内展开。2、不要过于熟，蛋白浓度保持在μg/mL～mg/mL。3、适合的pH，除非是展开探讨层析，所用于的缓冲溶液pH防止与pI完全相同，避免蛋白质的溶解。

4、用于蛋白酶抑制剂，避免蛋白酶对目标蛋白的水解；在提纯细胞中的蛋白质时，重新加入DNA酶，水解DNA，避免DNA对蛋白的污染。5、防止样品重复冻融和轻微摇动，防止蛋白质的变性。6、缓冲溶液成分尽可能仿真细胞内环境。

7、在缓冲溶液中重新加入0.1~1mmol/L DTT(或β-巯基乙醇），避免蛋白质的水解。8、特1~10mmol/L EDTA金属螯合剂，避免重金属对目标蛋白的毁坏。

9、用于消毒溶液，避免微生物生长。

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